C18固相萃取柱在GB 5009.121—2016食品中脱氢乙酸的测定的应用

检测方法：固相萃取法检测食品中脱氢乙酸

参考标准：《GB 5009.121—2016食品安全国家标准 食品中脱氢乙酸的测定》

1. 样品提取

1.1 果蔬汁、果蔬浆

称取样品2g~5g（精确至0.001g），置于50mL离心管中，加入约10mL水，用氢氧化钠溶液（20g/L）调pH 至7.5，转移至50mL容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。置于离心管中，4000r/min离心10min。取20mL上清液用10%的甲酸溶液(70%)调pH至5，定容到25mL。

1.2 面包、糕点、焙烤食品馅料、复合调味料

样品用粉碎机粉碎或不锈钢高速均质器均质。称取样品2g~5g（精确至0.001g），置于25mL离心管(如需过固相萃取柱则用50mL离心管)中，加入约10mL水、5mL硫酸锌溶液(120g/L)，用氢氧化钠溶液(20g/L)调pH至7.5，转移至25mL容量瓶（如需过固相萃取柱则用50mL容量瓶）中，加水稀释至刻度，摇匀。置于离心管中，超声提取10min，转移到分液漏斗中，加入10mL正己烷，振摇1min，静置分层，弃去正己烷层，加入10mL正己烷重复进行一次，取下层水相置于离心管中，4000r/min离心10min。取上清液过0.45μm 有机滤膜，供高效液相色谱测定。若高效液相色谱分离效果不理想，取20mL上清液，用10%的甲酸(70%)调pH至5，定容到25mL。

1.3 黄油

称取样品2g~5g(精确至0.001g)，置于25mL离心管(如需过固相萃取柱则用50mL离心管)中，加入约10mL水、5mL硫酸锌溶液(120g/L)，用氢氧化钠溶液(20g/L)调pH 至7.5，转移至25mL容量瓶(如需过固相萃取柱则用50mL容量瓶)中，加水稀释至刻度，摇匀。置于离心管中，超声提取10min，转移到分液漏斗中，加入10mL正己烷，振摇1min，静置分层，弃去正己烷层，加入10mL正己烷重复进行一次，取下层水相置于离心管中，4000r/min离心10min。取上清液过0.45μm有机滤膜，供高效液相色谱测定。若高效液相色谱分离效果不理想，取20mL上清液，用10% 的甲酸(70%)调pH至5，定容到25mL。

2. SPE柱净化

（C18固相萃取柱，货号：SYC18-50060，规格：500mg/6ml）

活化：用5mL甲醇及10mL水活化柱子。

上样和洗脱：取5mL待净化液过已活化固相萃取柱，用5mL水淋洗，2mL 70%的甲醇溶液洗脱,收集洗脱液2mL，涡旋混合，过0.45μm有机滤膜。

3. 加标

本方法中取样量为5g，加标浓度10μg/g，上机浓度2μg/mL。

4. 仪器条件

色谱柱：C18(5μm，4.6mm*250mm)。

流动相：甲醇+0.02mol/L乙酸铵=10+90

流速：1mL/min

柱温：30℃。

进样量：10μL。

检测器：DAD检测器。

检测波长：293nm。

5. 检测图谱

                                                      图1 . 2μg/mL脱氢乙酸液相图谱

6. 实验结果